薄层色谱扫描仪检定规程 1 说明 1.1 薄层色谱扫描仪是在经过薄层色谱分离后, 对薄层板上分离出来的在紫外和可见光区有光吸收的斑点, 或经激发后能发射出荧光的斑点, 进行光扫描, 将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。 根据仪器的不同可以进行反射吸收测定、 透射吸收测定或荧光测定; 可采用 单波长测定或双波长测定; 扫描方式有线性扫描或锯齿扫描。Kubelka-Munk 方程是薄层色谱扫描法的依据。 1.2 常见的薄层扫描仪大都附有线性化器、 背景补偿、 背景抑制和自动背景抑制等附件, 用以消除背景的影响。 并附有荧光附件, 可以扫描荧光斑...

  薄层色谱扫描仪检定规程 1 说明 1.1 薄层色谱扫描仪是在经过薄层色谱分离后, 对薄层板上分离出来的在紫外和可见光区有光吸收的斑点, 或经激发后能发射出荧光的斑点, 进行光扫描, 将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。 根据仪器的不同可以进行反射吸收测定、 透射吸收测定或荧光测定; 可采用 单波长测定或双波长测定; 扫描方式有线性扫描或锯齿扫描。Kubelka-Munk 方程是薄层色谱扫描法的依据。 1.2 常见的薄层扫描仪大都附有线性化器、 背景补偿、 背景抑制和自动背景抑制等附件, 用以消除背景的影响。 并附有荧光附件, 可以扫描荧光斑点的强度, 与对照品斑点比较, 测定荧光物质的含量。 1.3 本规程主要参照山东省地方检定规程薄层色谱扫描仪 (初稿)、上海市药品检验所 CS-910薄层扫描仪检定法和湖北省药品检验所 CS-930 型双波长薄层扫描仪检验方法 (暂行) 制定。 2 检定项目和技术要求 2.1 波长准确度 5nm 2.2 背景漂移 0.5Abs 2.3 基线噪声 反射和透射方式误差均0.02Abs 2.4 重复性误差 RSD2.0% 3 检定条件 3.1 环境条件 3.1.1 室温 10~30℃, 相对湿度小于 65%。 3.1.2 室内不应有影响检定的强电场、 强磁场和强烈气流。 3.2 检定设备与试剂 3.2.1 笔式低压汞灯 3.2.2 空白标准薄层板 3.2.3 甲基红指示液(中国药典 1995 年版附录) 4 检定方法 4.1 波长准确度的测定 4.1.1 测定条件 光谱测定方式: 光源选用低压汞灯, 光源选择置汞灯位置, 采用小狭缝,负高压用手动控制, 荧光测定方式。 4.1.2 测定方法 将空白薄层板置样品台上, 对准光束, 用波长设定键调波长至 436nm 处, 调整低压汞灯位置, 使读数出现最大值, 用手动负高压调小读数, 使记录笔在适当位置, 然后扫描200~700nm 的汞灯谱线, 并打印出峰位置, 与汞灯规定的谱线、 435.7、 546.1 和 579.0nm 的波长比较。 4.1.3 也可用仪器上的氘灯在 486.0 和 656.1nm 处的谱线测定波长准确度。 测定方法可参照上述 4.1.1 和 4.1.2, 采用透射方式, 样品台不放薄层板, 将负高压调至手动位置, 调整波长,检查氘灯的两条谱线与仪器的标示波长相比较。 4.1.4 参比波长准确度的测定, 可参照上述同样方法进行。 4.2 背景漂移的测定 4.2.1 测定条件 采用光谱测定, 光源分别用钨灯和氘灯, 测定方式为反射。 4.2.2 测定方法 将空白薄层板置样品台上, 对准光束, 分别扫描 337~700nm 和 200~320nm,并计算漂移值。 4.3 基线噪声的测定 参照上述 4.2.1 和 4.2.2 背景漂移项下, 将波长分别调至 250nm 和 630nm 处, 作时间扫 描半分钟, 观察基线上峰(谷) 的最大值。 4.4 重复性误差的测定 4.4.1 标准样品薄层板的制备 取甲基红指示液 1ml, 加 0.05mol/L 氢氧化钠溶液 2ml, 加水稀释至 100ml, 以 3l 点至已铺好的空白薄层板上, 晾干后使用。 4.4.2 色谱条件 先用光谱方式测定薄层板的参比波长和样品的测定波长, 波长确定后, 再用色谱方式选择适当的光源狭缝, 双波长测定, 锯齿形扫描。 4.4.3 色谱方法条件设定好后, 将标准样品薄层板置样品台上, 使斑点位于光束中央的下方,并记录 X 和 Y 的位置, 然后连续扫描 10 次, 打印出峰面积, 按下式计算相对标准偏差 RSD。RSD =%1001X) 1/()(12inXXni i X : 第i 次测得峰面积 X : n 次测量结果的算术平均值 i : 测量序号 n : 测量次数 5 检定结果的处理和检定周期 5.1 由于薄层色谱扫描技术的不断完善, 不同型号的仪器功能有所不同, 使用方法也不尽相同, 因此测定时设定条件有所差异, 但其主要项目可参照上述方法进行测定。 5.2 检定结果全部项目均符合技术要求者, 判为合格, 方可使用。 如不符合, 应予检修后再行检定。 5.3 仪器检定周期为一年, 仪器如经搬动, 修理或发现测定结果可疑时, 应及时重新检定。 起草人: 于延华 刘明洁(山东省药品检验所) 定稿人: 周静远(天津市药品检验所) 孙曾培(中国药品生物制品检定所)

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